大蒜素减轻氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞焦亡

摘要

目的研究大蒜素对氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensitylipoproein,ox-LDL)触发的巨噬细胞焦亡的抑制作用,并探究其可能的分子机制。方法RAW 264.7巨噬细胞,给予大蒜素(12.5、25、50和100 mg/L)和二亚苯基碘鎓(DPI)5μmol/L预处理1 h,再加入100 mg/L ox-LDL继续孵育24 h。分别采用TUNEL、MTT、ELISA法和相应的试剂盒检测细胞死亡情况和细胞活力、培养基IL-1β和IL-18浓度以及培养基乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和细胞内caspase-1、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平。随后,应用Western blotting法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的表达变化。结果和DPI氧化应激抑制剂相似,大蒜素可以显著抑制ox-LDL触发的巨噬细胞焦亡作用,增加细胞活力,减少ox-LDL刺激引起的TUNEL阳性细胞率以及巨噬细胞LDH漏出,并可减少白介素⁃1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)和白介素⁃18(interleukin⁃18,IL⁃18)的分泌,且呈浓度依赖性;与DPI相似,大蒜素能够显著抑制ox-LDL触发的NLRP3上调和caspase-1活化,并明显抑制ox-LDL介导的氧化应激反应,表现为SOD活性增加、ROS和MDA生成减少。结论大蒜素可减轻ox-LDL所触发的巨噬细胞焦亡,该作用主要与减弱氧化应激反应从而抑制NLRP3-caspase-1信号通路的活化有关。