灵芝提取物在肿瘤免疫治疗中的调节作用

摘要

目的将灵芝提取物与肿瘤免疫制剂联合运用,探讨灵芝提取物在肿瘤免疫治疗中的调节作用。方法纯化Hepa 1-6细胞的肿瘤热休克蛋白70多肽复合物(HSP70-PCs),SDS-PAGE及Western-blot对产物进行鉴定。将Hepa 1-6细胞浓度调整为4×107/ml,按0.1 ml/只接种于C57BL/6j小鼠背部皮下建立实验模型。随机将模型分为PBS对照组、灵芝提取物组(L组)、HSP70-PCs组(H组)、CpG-ODN组(C组)、灵芝提取物联合HSP70-PCs组(L+H组)和灵芝提取物联合CpG-ODN组(L+C组),每组10只。L组、L+C组、L+H组于建模的第7天开始予灵芝提取物按4 g/kg体重灌胃,1次/d,直至实验组小鼠死亡或实验结束;C组和L+C组予瘤旁皮下注射CpG-ODN 100μg/只,每周2次,共8次;H组和L+H组予瘤体对侧背部皮下注射HSP70-PCs 10μg/只,每周1次,共4次。对照组予皮下注射灭菌PBS液0.1 ml/只,每周1次,共4次。定时测量瘤体大小,记录肿瘤生长情况、有无转移灶及生存时间。ELISA法检测实验鼠血清CXCL-9、CXCL-10、IFN-γ水平。运用SPSS 16.0软件进行数据处理。结果灵芝提取物联合CpG-ODN或HSP70-PCs可以诱导抑瘤作用,肿瘤体积、质量、肿瘤转移率及生存期限与单独使用HSP70-PCs或CpG-ODN比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);灵芝提取物联合CpGODN或HSP70-PCs可以提高荷瘤小鼠血清中CXCL-9、CXCL-10和IFN-γ水平,与二者单独使用组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论灵芝提取物可通过诱导Th1型细胞因子表达来发挥免疫调节作用,对肿瘤免疫治疗有增强作用。