川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

摘要

目的:通过观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFB)增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法:差速贴壁法提取原代SD乳鼠CFB,采用3～4代CFB进行检测。以甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)法测定细胞数目,观察CFB增殖情况;收集细胞培养上清,以酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测Ⅰ型胶原的合成;提取细胞总mRNA,以逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)半定量检测Ⅰ型胶原mRNA的表达情况。结果:(1)MTT结果显示,0.1μmol/LAngⅡ组CFB光密度(optical density,OD)值高于空白对照组(P<0.05)。0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组和0.1μmol/LAngⅡ+600μg/mLTMP组OD值均低于0.1μmol/LAngⅡ组,但仅0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组与之比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)0.1μmol/LAngⅡ组CFB上清液中Ⅰ型胶原含量高于空白对照组(P<0.01)。0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组CFB上清液中Ⅰ型胶原含量低于0.1μmol/LAngⅡ组(P<0.05)。(3)0.1μmol/LAngⅡ组Ⅰ型胶原mRNA表达高于空白对照组(P<0.05)。0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组Ⅰ型胶原mRNA表达低于0.1μmol/LAngⅡ组(P<0.05)。结论:川芎嗪可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞的增殖,减少Ⅰ型胶原的分泌与合成。