逆转录聚合酶链反应用于检测恶性疟原虫的初步研究

摘要

目的　建立逆转录聚合酶链反应系统 ,用于检测恶性疟原虫感染。方法　以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段 ,设计一对特异引物 ,分别采用RT -PCR技术和PCR技术进行检测恶性疟原虫血样并比较两者检测的敏感性。结果　从培养的恶性疟血样中扩增出 35 9bp特定扩增带 ,而间日疟和健康人血样均未见扩增带。经限制性内切酶分析证实扩增产物为目的片段。检测系统初步显示可检出恶性疟血样中 0 34个疟原虫所含的RNA模板。以RNA为检测对象的RT -PCR肉眼可见条带的检测水平较以DNA为检测对象的PCR扩增高。结论　RT -PCR检测恶性疟原虫方法具有敏感性高、特异性强的特点 。