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抗日本血吸虫噬菌体抗体库的筛选和阳性克隆的鉴定

         

摘要

目的 研制抗日本血吸虫循环抗原Sj MAg的单链抗体。  方法 用日本血吸虫成虫代谢抗原Sj MAg包板 ,对已构建的抗日本血吸虫噬菌体抗体库进行 3轮富集 ,然后用ELISA法从富集的次级抗体库中筛选阳性克隆 ,最后借助ELISA、SDS PAGE和Western印迹等方法 ,根据阳性克隆表达产物与其它 4种吸虫抗原反应的情况 ,进行特异性鉴定。 结果 从随机挑取的 72个克隆中筛选到阳性克隆 6个 ,经交叉筛选和鉴定最终获得特异性抗日本血吸虫阳性克隆 2个。 结论 用固相富集和ELISA筛选法可以从抗体库中有效地筛选到抗日本血吸虫循环抗原的阳性克隆 ,获得的抗体克隆可用于抗日本血吸虫循环抗原单链抗体的制备。

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