HPLC-MS/MS检测杜仲中绿原酸等4种活性成分的分析方法

摘要

杜仲作为一种传统的中药材,其活性成分主要包括绿原酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷和京尼平苷酸等。本研究建立了一种HPLC-MS/MS（高效液相色谱质谱联用仪）检测的方法,可同时检测杜仲中桃叶珊瑚苷、京尼平苷、京尼平苷酸和绿原酸的含量。建立的色谱条件：色谱柱XD-C18,流动相为0.1%甲酸水溶液和甲醇,流速0.15 mL/min,柱温30℃。质谱条件：ESI离子源作为裂解源,裂解温度280℃,源内电压4 kV,鞘气辅助气为氮气,流速30 psi,雾化气为氦气,流速10 psi。结果表明：4种目标化合物的色谱峰分离情况良好,质谱鉴定为目标物;绿原酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷和京尼平苷酸标准曲线的相关性系数分别为0.993 5、0.994 2、0.996 9、0.994 8;最低检测限的范围是7.603-8.853 pmol;加样回收率范围是91.838%-108.326%。测定得到杜仲叶中桃叶珊瑚苷的含量为（20.552±4.032）ng/mg干质量,京尼平苷酸含量为（6.913±0.654）ng/mg干质量,绿原酸含量为（25.986±3.412）ng/mg干质量,京尼平苷含量为（0.205±0.015）ng/mg干质量。利用该方法在7种植物组织中进行方法验证,测定得到4种目标化合物的含量,表明本方法有效且适用性广。