荧光光谱法研究杨树菇半乳糖凝集素与半乳糖和β-半乳糖苷的相互作用

摘要

半乳糖凝集素是一类具有重要生理功能的蛋白质,杨树菇(Agrocybe aegerita)半乳糖凝集素(AAL)是被报道的第四种真菌半乳糖凝集素。本文用荧光光谱法研究了半乳糖、乳糖和X-gal两种含β-半乳糖残基的分子与AAL的相互作用。研究结果表明:半乳糖对AAL的荧光光谱无明显影响;乳糖的结合使AAL折叠为更紧密的结构而使其光谱蓝移;X-gal与AAL的结合强烈猝灭AAL的荧光,且X-gal的紫外吸收光谱与AAL的荧光发射光谱有一定程度的重叠,由此得出了其反应的结合常数(Kb=7.33×103L.mol-1),结合位点数(n=8.3)及作用距离(r=2.79 nm)。用同步荧光光谱法比较了乳糖和X-gal对AAL构象的影响,结果表明,乳糖和X-gal对AAL的结合方式有可能不同。此结果为深入研究AAL的生理功能提供了线索。