双歧杆菌基因组DNA提取几种方法的比较

摘要

双歧杆菌的保健功能现已为人们广泛认可,随着双歧制品微生态制剂普及,人们对相关产品内在质量投诉也相应增多,因此快速鉴定产品中双歧杆菌是当务之急,由于双歧杆菌目前检测缺乏有效的选择培养基和鉴别培养基,依据其形态和生理特性进行鉴别程序复杂,结果不稳定,因此双歧杆菌的分子生物学检测一直是近年研究热点,目前报道较多的有PCR法,RAPD法,RFLP法,而在PCR和RAPD扩增中,都对DNA纯度有较高要求,特别是干扰PCR扩增的多糖和蛋白质要清除掉,由于双歧杆菌细胞壁有类似真菌的特性,因此其DNA提取不同于革兰氏阴性菌(溶菌酶-煮沸法),据文献报到目前双歧杆菌DNA提取有几种方法,溶菌酶-SDS-醋酸钾法[1],溶菌酶-SDS-酚/氯仿法[2],溶菌酶-煮沸法,改良氯化苄法[3].本实验对该四种方法做了比较,认为醋酸钾法和氯化苄法提取DNA效果较好.