光动力疗法中竹红菌乙素在细胞中含量的检测

摘要

目的研究光敏剂孵育时ECV304细胞和培养液中竹红菌乙素(HB)的含量,以及HB在细胞和培养液中的光漂白。方法体外培养ECV304细胞,HB的孵育浓度分别为10、30μg/ml,每个浓度组再分为照光组和未照光组。未照光组HB孵育2 h后,用荧光显微镜观察细胞中HB的荧光分布;然后分别用乙酸乙酯萃取细胞和培养液中的HB后用吸收光谱测定HB的含量。照光组用532 nm激光照射,采用上述方法测量细胞和培养液中HB的含量,并进行HPLC图谱分析。结果HB的孵育浓度为10、30μg/ml,孵育浓度增加细胞中HB浓度并不随之成比例增加,激光照射使细胞和培养液中的HB都发生了光漂白。结论利用HB的浓度吸收光度值的标准曲线,可以估算出细胞中以及光照后HB的含量。