pH对体外培养成年大鼠嗅鞘细胞存活的影响

摘要

为了研究不同pH培养环境对体外培养大鼠嗅鞘细胞(OECs)存活的影响,本研究采用成年大鼠嗅球培养OECs,培养第8d用S-100免疫组化鉴定纯度后,改用不同pH值(6.8,7.0,7.4,7.8)的DF12培养液继续,在相差显微镜下观察OECs的形态学变化。在不同pH条件下继续培养第3d时采用MTT方法检测不同pH环境中的细胞活力,并用碘化丙啶(PI)和Ho-echst33342荧光双重染色观察细胞死亡率。结果显示:大鼠OECs纯度为(70±4)%;pH7.4组OECs生长旺盛,pH6.8组及pH7.0组OECs生长增殖受到不同程度的抑制,出现死亡细胞;pH7.8组OECs广泛死亡;MTT试验表明,pH7.4组的OD值显著高于其他各pH组。PI/Hoechst33342双重荧光染色显示,在pH6.8、pH7.0和pH7.8组死亡OECs的百分比分别为(27.6±7.8)%、(31.7±7.2)%和(62.3±5.6)%。在pH7.4组未见到死亡的OECs。研究结果表明OECs对酸、碱性环境改变均较敏感,尤其是碱性环境。