25例原发性肝细胞性肝癌中P16基因失活的研究

摘要

目的：调查Ｐ１６基因是否与原发性肝细胞性肝癌（ＰＨＣＣ）的发生有关。方法：采用多重ＰＣＲ分析法、单链构象多态性（Ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍ ａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍ ｏｒｐｈｉｓｍ ，ＳＳＣＰ）分析法及以ＰＣＲ为基础的甲基化分析法对２５例原发性肝细胞性肝癌（ＰＨＣＣ）标本及其相应的非肿瘤肝组织标本中Ｐ１６ 基因的缺失、点突变及甲基化情况进行检测。用免疫组织化学法对３５例（包括前述已作基因检测的２５ 例）原发性ＨＣＣ肿瘤标本及其相应的非肿瘤组织标本中Ｐ１６ 蛋白的表达情况进行了调查。结果：２５ 例ＨＣＣ肿瘤标本中，３ 例有Ｐ１６基因缺失，其中２例为纯合子缺失，１例为半合子缺失。另发现１例Ｐ１６基因无缺失者有Ｄ９ｓ１６２缺失。无Ｐ１６基因缺失的２２例肿瘤标本中均未发现有Ｐ１６ 基因点突变存在。肿瘤标本中基因的甲基化发生率为２４％ （６／２５），而全部非肿瘤组织均未出现Ｐ１６基因甲基化。在３５例ＨＣＣ肿瘤标本中发现Ｐ１６蛋白表达缺失１６ 例（４５．７％ ），而全部非瘤组织Ｐ１６ 蛋白均表达阳性。Ｐ１６ 蛋白表达缺失与肿瘤的病理分级有关，分级高者（Ⅲ、Ⅳ级）比分级低者更易发生（Ｐ＜ ０．０１）。在２５例作了Ｐ１６基因检?