小分子干扰RNA抑制大鼠心肌H9C2细胞血管紧张素转换酶2的表达

摘要

目的研究siRNA对大鼠心肌H9C2细胞血管紧张素转换酶2(ACE2)的抑制作用。方法根据大鼠ACE2基因序列设计并化学合成3条siRNA及1条阴性对照siRNA,并标记FAM荧光,以Lipofectamine2000转染入大鼠心肌H9C2细胞,用Realtime Quantity RT-PCR和Western-blot分别检测ACE2基因和蛋白表达量的改变、验证所设计的siRNA的抑制效应。结果以Lipofectamine2000转染所设计的siRNA进入H9C2细胞,转染效率>95%。起始于434、567位点的siRNA在基因水平对ACE2无明显抑制效应(P>0·05);起始于1205位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降73·5%(P<0·05);蛋白水平下降70·0%(P<0·01)。结论起始于1205位点的siRNA对大鼠心肌H9C2细胞ACE2有明显的抑制效应。