玉米两个RFLP标记的原位单杂交与共杂交定位的比较

摘要

ＲＦＬＰ标记ｂｎ１８．２３和 ｕｍｃ１１１位于玉米遗传日第 ４连锁群近端，彼此密切连锁但次序尚未确定。用生物素标记对它们进行了原位单杂交和共杂交的比较定位。在植物中，这类原位共杂交的研究为首次报道。在单一探针的原位杂交中 ｕｍｃ１１１被定位在第 １、 ４和９染色体长上，与着丝粒的百分距离分别是７．３６±２．６５、６３．６７±１．０７、４７．８７±２．９０。ｂｎ１８．２３被定位在第４和８染色体长臂上，与着丝粒的百分距离分别是８７．４２±２．４５和２７．６０±１．７５，清楚地表明了这两个标记在第４染色体上的次序。ｂｎ１８．２３和ｕｍｃ１１１分别与编码过氧化氢酶的ｃａｔ３基因和编码丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶的ｃｄｅ２Ａ基因紧密连锁。根据供试ＲＦＬＰ标记检出位点推断了基因ｃｄｃ２Ａ和ｃａｔ３的物理位置。原位共杂交在第 ４染色体长臂上同时显示出了ｕｍｃ１１１和ｂｎ１８．２３两个标记的杂交信号，它们的位置分别与单一探针原位杂交的位置基本吻合。这为低拷贝或单一拷贝等小片段ＤＮＡ物理定位的可靠性以及它们共杂交的可行性提供了令人信服的证据。