阿特拉津抗体芯片制作条件的优化

摘要

目的探讨制备阿特拉津抗体蛋白芯片的影响因素,优化制备的实验条件,为采用蛋白芯片技术检测阿特拉津打下基础。方法固定在醛基化玻片的兔抗阿特拉津单克隆抗体质量浓度分别为1.27、0.635、0.254、0.0127mg·mL-1,封闭液选择多种不同浓度的卵清蛋白和胎牛血清,缓冲液选择不同pH值的PBS,温度始终选择37℃,抗原抗体反应时间为15、30、60、120min,采用竞争法进行阿特拉津样品检测,GenePixTm4000B扫描仪进行扫描,分析荧光信号强度。结果荧光信号强度随阿特拉津抗体浓度的增加、反应时间的延长而增强。选择2%OVA封闭、pH7.2稀释样品溶液时背景值最低。结论当阿特拉津抗体质量浓度为1.27mg·mL-1、2%OVA封闭、pH值7.2～9.0,抗原抗体反应时间60～120min时,可以得到较理想的检测结果。