siRNA抑制食管癌EC9706细胞CXCR4基因表达的实验

摘要

目的运用RNAi技术沉默食管癌EC9706细胞CXCR4(chemokine receptor4)基因表达,观察其对肿瘤细胞的生长和转移影响。方法设计CXCR4基因为靶向的siRNA,构建siRNA表达载体,通过脂质体将siRNA表达载体转入EC9706细胞。荧光定量PCR法检测细胞CXCR4 mRNA表达水平;流式细胞术检测细胞周期;MTT法检测细胞侵袭和增殖的情况。结果构建出CXCR4基因为靶向的siRNA表达载体pRNAT-U6.2/Lenti-siCX1和pRNAT-U6.2/Lenti-siCX2;荧光定量PCR结果显示,转染pRNAT-U6.2/Lenti-siCX1的EC9706细胞和转染pRNAT-U6.2/Lenti-siCX2的EC9706细胞与对照组相比CXCR4 mRNA的表达水平明显降低(P<0.01);细胞生长速度较对照组明显减慢(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示:转染pRNAT-U6.2/Lenti-siCX1的EC9706S期细胞比例低于对照组(P<0.05)。结论沉默CXCR4基因表达对食管癌EC9706细胞的生长和侵袭、转移有明显的抑制作用。