人巨核白血病细胞诱导分化后差异表达基因的mRNA差别显示和克隆

摘要

目的：克隆巨核白血病细胞诱导分化后表达变化的ｍＲＮＡ，从中寻找对诱导分化起关键作用的基因，最终揭示巨核白血病细胞诱导分化的分子机制。方法：人巨核白血病细胞ＨＩＭｅｇ经１３－顺式维甲酸处理４ｄ后，收集细胞总ＲＮＡ，进行ｍＲＮＡ差别显示、ｃＤＮＡ片段克隆和序列分析。结果：获得５个差示ｃＤＮＡ片段，经ＲＮＡ点杂交分析后发现其中３个为假阳性，１个因没有杂交信号而无法确定，只有１个ｃＤＮＡ片段得到证实，其对应的ｍＲＮＡ在诱导分化后表达下降。该ｃＤＮＡ片段的核苷酸序列已在ＧｅｎＢａｎｋ中登录，登录号为ＡＦ０２６５２６。结论：克隆到一个未知基因的ｃＤＮＡ片段，其全长ｃＤＮＡ序列。