异体软骨细胞移植修复猪膝关节软骨缺损的免疫学观察

摘要

目的应用同种异体软骨细胞移植修复猪膝关节软骨缺损,评估术后免疫学表现及其修复效果。方法供体为1月龄上海白猪2头,取其膝关节全层软骨片,0.25%胰蛋白酶和0.2%型胶原酶消化,分离培养软骨细胞。受体为2月龄巴马猪8头,在两侧股骨髁关节负重面造成0.5cm×0.5cm软骨缺损,深及软骨下骨。于受体猪双侧膝关节软骨缺损处注入软骨细胞悬液0.2ml,含软骨细胞(1.0～2.0)×106个,密封入口。术前、术后3、5、7、12周分离受体外周血淋巴细胞,检测其与异体软骨细胞混合后的刺激指数(stimulationindex,SI);术后5、7、24周取修复区软骨及软骨下骨观察局部组织学反应。结果术后3、5、7、12周受体外周血淋巴细胞SI分别为1.457±0.062、1.739±0.142、1.548±0.047和1.216±0.028,较术前(1.102±0.034)增高,且差异均有统计学意义(P<0.05);SI术后3周开始升高,5周达高峰,7、12周后开始逐渐下降;3、7、12周SI与5周比较差异均有统计学意义(P<0.05)。组织学观察:术后5周,出现较多的炎性浸润,分散于软骨下骨、修复组织与正常软骨的整合部等;7周,炎性浸润开始减退,仅在软骨下骨可见;24周,缺损处修复软骨与周围软骨整合良好。结论异体软骨细胞移植后,免疫反应一般在移植早期开始出现,并逐渐达到高峰,但随着软骨基质的重新合成,免疫反应也逐渐下降,并最终修复全层关节软骨缺损。