真皮多能干细胞复合聚乳酸支架修复关节软骨全层缺损的实验研究

摘要

[目的]探讨真皮多能干细胞在软骨缺损修复中的可行性，为扩大软骨缺损修复中种子细胞的选择提供实验依据。[方法]以新生青紫蓝兔为研究对象，机械法直接分离得到真皮组织，采用酶消化法获取细胞，利用干细胞贴壁粘附生长的特性获取高克隆细胞群，并进行传代培养。使细胞浓度达到1×10^6／ml与聚乳酸支架材料共培养一周后植入兔膝关节软骨全层缺损处，用3～5个月龄青紫蓝兔30只，60个关节，随机分为真皮多能干细胞／聚乳酸支架材料、聚乳酸支架材料、空白对照三组，每组20个关节，于术后12周空气栓塞处死实验兔，对修复组织进行取材，行HE、甲苯胺蓝染色，根据软骨缺损修复情况进行大体、组织学评分，并进行统计学分析，比较各组的评分差异是否具有统计学意义。[结果]大体及组织学观察显示，真皮干细胞／支架材料实验组修复组织表面光滑、呈透明样，与周围软骨及软骨下骨整合良好，而聚乳酸支架材料组有少许透明样软骨，主要以纤维软骨修复，空白对照组则表面有缺损，以纤维软骨修复。大体及组织学观察后进行统计学评分分析，显示A组修复效果最优、优于B、C组（P〈0．05），B组优于C组（P〈0．05）[结论]真皮多能干细胞修复关节软骨缺损效果明显，恢复正常关节软骨结构，可作为组织工程化软骨种子细胞之一。