一种适合大豆MicroRNA鉴定的RT-PCR方法

摘要

MicroRNAs(miRNAs)是一类调控真核基因转录后表达的非编码小分子RNA。绝大多数miRNAs由计算机预测得到,其存在与否及时空分布还不清楚。因此建立高效、敏感和特异的检测方法,是探明miRNAs在多种组织中时空调控的基础和前提。研究以Lau等和Shi等的方法为基础设计方案,采用通用反转录引物,以大豆幼叶、老叶、根、茎组织为研究材料,对预测的、且Sanger Institute公布的miR156a进行扩增以检测扩增效率和准确性。经比较,该方法具有反转录引物通用、成本低,操作简单,可快速、敏感、高通量地同时比较一种组织中多个miRNAs,也可比较多个组织中miRNA;且该方法比Northern Blot和Microarray需要的RNA量少得多。