人类M6b基因一种剪接型cDNA的分子克隆

摘要

蛋白脂蛋白（PLP）基因突变导致Pelizaeus－Merzbacher病（PMD）和部分X-连锁的痉挛性截瘫。Olinsky等克隆了M6b的部分序列（U45955），该基因认为是PLP基因家族成员之一。我们以巢式PCR得到一约300hp的片段，测序为与U45955的5′端局部重叠的新序列，拼接后得到1．642kb的序列，其中含有可编码265个氨基酸的开放阅读框。此阅读框经对脑cDNA文库PCR产物的测序确证（命名为M6ba）。M6ba的CDNA序列及其编码氨基酸序列与小鼠中M6b基因和蛋白质序列显著相似（分别为91．2％和93.4％一致）。Northern杂交的结果及cDNA文库PCR扩增、EST数据库分析的结果提示M6b基因至少存在3种剪接形式。M6ba基因与PLP基因显著相似，并且两蛋白质在所有疏水区高度保守。M6ba基因结构的分析，显示此基因编码区由7个外显子构成。