人脾脏树突状细胞的分离纯化与鉴定

摘要

目的　建立人脾脏体外培养树突状细胞的新方法。方法　人脾脏细胞悬液培养 2h后获得贴壁的单核细胞 ,加入重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (rhGMCSF) 10 0 μg/L或rhGMCSF 10 0 μg/L +重组人白细胞介素 4 (rhIL 4 ) 5 0 0k/L ,体外培养 1周 ,收集悬浮细胞 ,以流式细胞仪分析细胞表型及抗原内吞能力 ,alloMLR检测细胞抗原呈递功能。结果　以细胞因子培养 7d生成的悬浮细胞 ,2 0 %～ 80 %表达树突状细胞特异性标志CD1a ,表达高水平的MHC Ⅱ、B71、B72分子 ,具有较强的抗原内吞能力 ,抗原内吞能力及T淋巴细胞活性与人外周血单核细胞培养获得的DC相似。结论　从人脾脏获得的贴壁的单核细胞 ,体外以rhGMCSF +rhIL 4培养 。