猪生殖与呼吸综合征病毒△Gp5/M/N串联基因的克隆及原核表达

摘要

采用RT-PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR2332中扩增△Gp5、M和N基因片段,通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5/M/N,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS,筛选表达PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白的菌株。经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blotting。结果表明,PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,纯化后的蛋白可与PRRSV阳性血清发生特异性反应。证明原核表达系统表达的PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白具有良好的反应原性。