恶性疟原虫红内期p41-3基因的扩增及克隆

摘要

目的 构建恶性疟原虫海南（ＦＣＣ１／ＨＮ）株ｐ４１－３基因真核表达重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｐ４１－３，方法 根据ｐ４１－３基因已知序列设计合成２对引物，用ＰＣＲ技术从ＦＣＣ１／ＨＮ株基因组ＤＮＡ中扩增ｐ４１－３基因；将ｐ４１－３基因定向克隆入真核表达裁体ｐｃＤＮＡ３，转化大肠杆菌ＤＨ５α感受态细胞；用酶切，ＰＣＲ扩增鉴定筛选到的重组质粒阳性克隆、结果 从恶性疟原虫ＦＣＣ１／ＨＮ株基因组ＤＮＡ中获取ｐ４１－３基因，酶切，ＰＣＲ扩增鉴定表明获得正确的ｐｃＤＮＡ３－ｐ４１－３重组质粒。结论 成功构建了真核表达重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｐ４１－３，为在真核细胞中表达ｐ４１－３蛋白，并研究其功能奠定基础。