昆明山海棠提取物对血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

摘要

目的探讨昆明山海棠提取物 (THW 4 )对离体血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及凋亡的影响。方法培养家兔主动脉平滑肌细胞 ,加入不同浓度的THW 4进行处理 ,用MTT法测定细胞生长曲线 ,以AnnexinV FITC/PI双标记、透射电镜、原位末端标记法检测细胞凋亡。结果THW 4可以明显抑制VSMC增殖 ,呈剂量和时间依赖性 ,作用 4 8h的半有效抑制浓度 (IC50 )为 15 .6 μg/L ;VSMC在含 10～ 10 0 μg/LTHW 4的培养液中孵育 5 6h ,可检测到细胞早期凋亡 ,且凋亡率随THW 4浓度增加而升高 ;延长孵育时间至 72h ,透射电镜下可观察到典型的凋亡细胞形态学改变 ,原位末端标记法显示DNA片段化增多 ,有核碎裂、固缩等改变 ;细胞周期时相分布显示THW 4主要阻滞VSMC于G2 /M期。结论THW 4能有效抑制体外培养的VSMC增殖及诱导其凋亡 ,提示THW