血管内皮细胞生长因子基因移植制备大鼠血管瘤模型

摘要

目的:探讨血管内皮细胞生长因子基因移植制备大鼠血管瘤模型的可行性。方法:构建MFG逆转录病毒VEGF表达质粒(pMFGVEGF),转染鼠成肌细胞,将具有高分泌VEGF的大鼠成肌细胞移植入大鼠骨骼肌。大鼠随机分成对照组(15只)和VEGF组(18只)。对照组移植携带LacZ基因的成肌细胞,VEGF组移植转染有VEGF表达质粒并携带LacZ基因成肌细胞。注射部位:右腓肠肌;注射细胞数目:5×105/5μlPBS。2组按时间再各分成3亚组:C11、C24、C44,V11、V24、V44,分别于注射后第11、24、44天处死行移植部位组织学检查。结果:免疫荧光检测VEGF阳性的成肌细胞占85%～90%,ELISA法检测培养液中VEGF浓度平均为214ng/(106cell·24h)。注射后第24天注射VEGF成肌细胞的一侧鼠下肢肿大,组织学示肿大部位是由许多紊乱血管所构成的血管瘤。第44天所有VEGF注射的下肢肿胀更加明显,周径是对照肢体的2倍,表面皮肤发紫;组织学检查示VEGF注射侧肢体主要由血管瘤以及血池组成。VEGF组的免疫荧光显示此区域有单个或集聚成群的PECAM1阳性的细胞,这些细胞周围有巨噬细胞的浸润。而血管瘤相邻部位的肌肉内血管密度并没有改变(P<0.05)。V24组血标本检测不到VEGF。V44组VEGF水平为(40±21)ng/ml,而新生血管瘤内部血标本VEGF水平远远高于其全血水平。结论:VEGF基因移植方法可以产生稳定有效的大鼠血管瘤模型。