苦参碱对人肝癌Hep G2细胞内GSH水平调节和细胞杀伤作用

摘要

[目的]探讨苦参碱对人肝癌Hep G2细胞内GSH水平的调节以及诱导细胞死亡的机制。[方法]采用MTT法和ELISA试剂盒检测不同浓度不同作用时间苦参碱处理的Hep G2细胞活力;用谷胱甘肽还原酶检测谷胱甘肽(GSH)水平;用蛋白印迹试验(Western-blotting)检测细胞内细胞色素c和caspase-9的表达。[结果]用不同浓度(0.1、0.2、0.3、0.4和0.5mg/ml)苦参碱处理细胞24h和48h后Hep G2细胞存活率分别为95.24%±7.91%、85.32%±8.02%、64.79%±4.74%、53.91%±4.34%、49.00%±5.62%和68.59%±8.27%、56.55%±7.19%、34.79%±4.94%、23.31%±4.30%、18.27%±2.53%,提示苦参碱对人肝癌细胞具有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性。用0.1、0.3和0.5mg/ml苦参碱处理Hep G2细胞24h后其细胞凋亡率分别为27.77%、50.31%和71.26%,提示呈剂量依赖性。Western-blotting分析提示苦参碱能促进细胞色素c向胞浆内释放,进而使caspase-9水解。[结论]苦参碱通过线粒体信号转导途径诱导Hep G2细胞凋亡,并且通过消耗细胞内GSH产生氧自由基直接参与凋亡过程。