应用血清分离试剂盒纯化血清标志蛋白的研究

摘要

目的:研究采用血清分离试剂盒初步分离血清标志蛋白的效果。方法:应用血清分离试剂盒对血清中标志蛋白进行梯度pH洗脱,根据目的蛋白的洗脱条件,选择适合的缓冲液进行离子交换层析分离。结果:WCX-2和IMAC-3-Cu芯片检测结果显示,血清经血清分离试剂盒梯度pH洗脱后可得到初步分离,各组分中的蛋白数量都比原血清明显减少。其中在第3、4组分分别检测到目的蛋白M7789.8和M4300.80。选择缓冲液(20 mmolNaAc,pH4.0)进行离子交换层析,成功分离到目的蛋白M7789.8和M4300.80。结论:应用血清分离试剂盒不仅可以对血清进行初步分离,还能了解到目的蛋白表面一些氨基酸的基本构成和等电点范围,为后续进一步分离纯化目的蛋白提供参考。