钉螺血淋巴细胞及其功能的研究

摘要

目的研究获取钉螺血淋巴细胞的方法,观察其形态结构,研究其免疫等相关功能。方法参照外周淋巴器官中淋巴细胞的悬浮收集法,获取钉螺血淋巴细胞,经Giemsa染色后显微镜观察其形态。血淋巴细胞经结晶紫染色后分别计数悬浮法、传统压片法及针刺法获取的血淋巴细胞数,并进行方差分析和Dunnett-t检验。取冻融的血淋巴细胞上清进行免疫沉淀、抑菌、吞噬杀菌实验。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析血淋巴细胞蛋白组份相对分子质量(Mr)。结果钉螺血淋巴细胞分为圆形有丝状伪足、嗜酸性圆形无丝状伪足、嗜碱性圆形无丝状伪足和梭形细胞4种形态,平均直径依次约为10．93、6．13、6．08及11．06μm,各约占细胞总数的50％、30％、5％及15％。每只钉螺悬浮法、传统压片法及针刺法获取的血淋巴细胞均数分别为1．50、0．66及0．03万／ml。悬浮法与传统压片法、与针刺法差异有统计学意义(F=281．47,P<0．01)。进一步Dunnett-t检验,悬浮法与压片法、与针刺法的血淋巴细胞总体均数差异有统计学意义(t1=15．67,t2=24．50,两组P<0．01)。血淋巴上清与日本血吸虫虫卵可溶性抗原(SEA)反应出现絮状沉淀．抑菌试验对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌出现明显的抑菌圈,血淋巴细胞对白色念珠菌的吞噬率和杀菌率分别为86％和46％。血淋巴细胞蛋白组份相对分子质量约为Mr112 300、107 100、97 200、73 500、60000及12 000。结论悬浮法可获得大量钉螺血淋巴细胞,其具有沉淀SEA、抑制金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌生长。以及吞噬杀灭白色念珠菌等免疫功能。