紧密连接蛋白Occludin在非酒精性脂肪肝大鼠肠上皮细胞中的表达及其与TNF-α的关系

摘要

目的:研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肠上皮细胞中紧密连接蛋白Occludin的表达及与肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系.方法:30只♂SD大鼠平均分为2组,对照组普通饮食,模型组给予高脂饮食,喂养12wk后处死.模型组肝脏HE染色显示脂肪肝造模成功.采用放免法检测血清TNF-α水平,取肝脏组织行免疫组织化学检测TNF-α的表达,取空肠组织应用免疫组织化学检测肠上皮细胞间紧密连接蛋白Occludin表达并电镜下观察肠上皮细胞间紧密连接部位的变化.结果:模型组血清TNF-α水平较对照组明显增高,差异具有统计学意义(3.21μg/L±0.45μg/Lvs2.10μg/L±0.29μg/L,t=-6.157,P<0.01).模型组大鼠肝脏TNF-α阳性物质主要分布在肝细胞的胞质,呈棕黄色细颗粒状,而对照组仅个别散在肝细胞阳性.对照组Occludin蛋白主要沿大鼠空肠黏膜上皮细胞膜的顶端呈线状分布,而模型组阳性染色较之明显减弱,呈非连续性分布.电镜下模型组紧密连接明显短于对照组,具有显著性差异(0.50μm±0.21μmvs0.78μm±0.19μm,P<0.05).结论:TNF-α可能抑制了空肠上皮细胞中紧密连接蛋白Occludin的表达,从而破坏了肠黏膜机械屏障,促进NAFLD的发生及发展.