siRNA沉默HIF-1α在缺氧状态下对食管鳞癌细胞VEGF表达的影响

摘要

目的观察体外乏氧培养条件下食管鳞癌细胞系EC9706中HIF-1α和VEGF的表达,探讨HIF-1α在低氧条件下对食管鳞癌血管生成的调控作用。方法CoCl2化学缺氧法模拟肿瘤缺氧环境,RT-PCR、免疫组化法和免疫印迹法分别检测缺氧状态下HIF-1α和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达。采用化学合成小干扰RNA(siRNA)介导的RNA干扰技术(RNAi)用siRNA转染EC9706细胞。观察转染后HIF-1α沉默效果。结果低氧条件下,EC9706细胞HIF-1α mRNA水平稳定,蛋白表达显著升高,而VEGF mRNA和蛋白的表达均显著升高。SiRNA转染EC9706后能够显著下调HIF-1α的基因表达,同时VEGF基因的表达也受到明显抑制。结论缺氧促使EC9706细胞HIF-1α在蛋白水平表达升高,并通过转录激活VEGF的机制调控食管鳞癌血管生成。