巨噬细胞刺激蛋白及其受体酪氨酸激酶RON在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用

摘要

目的研究巨噬细胞刺激蛋白(MSP)及其受体酪氨酸激酶RON在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症中的作用及相关机制。方法单纯熏香烟法建立COPD大鼠模型;分离、培养正常和COPD大鼠肺泡巨噬细胞(AM),分别予不同剂量的MSP处理24 h。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中MSP及AM上清液中IL-1β、TNF-α、IL-8和IL-10的浓度,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠肺组织中酪氨酸受体激酶RON mRNA的表达情况,免疫组化法观察大鼠肺组织和离体培养的AM中RON蛋白的表达情况,比色法检测AM上清液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的水平。结果与正常对照组比较,COPD组大鼠血清和BALF中MSP的浓度显著增高(P<0.01)。COPD组大鼠肺组织RON mRNA表达较正常对照组明显上调(P<0.01),COPD组大鼠支气管上皮及AM中RON蛋白水平也较正常对照组显著增加(P<0.01)。MSP呈剂量依赖性刺激正常和COPD大鼠AM细胞产生MDA增加并导致其SOD活性降低,亦能刺激两组大鼠AM释放炎症因子TNF-α、IL-8、IL-1β和IL-10呈剂量依赖性增加。在相同剂量MSP作用下,COPD组大鼠AM上清液中MDA及TNF-α、IL-8和IL-1β的浓度均高于正常对照组(P<0.01),而IL-10的浓度和SOD的活性则低于正常对照组(P<0.01);其中TNF-α、IL-8和IL-1β浓度的增加幅度及SOD活性降低的幅度大于正常对照组(P<0.01),而MDA和IL-10升高的幅度则低于正常对照组(P<0.01)。相关分析显示MSP和RON分别与BALF中细胞总数和AM计数呈正相关(P<0.01),与肺气肿指标呈一定的相关关系(P<0.01)。结论 MSP及其受体RON参与了COPD的气道炎症调节,其机制可能是MSP/RON促进了AM释放炎症因子和诱导氧自由基产生增多。