核糖核酸酶保护法MD-2探针的制备

摘要

目的　构建用于核糖核酸酶保护法的MD 2转录质粒并制备反义RNA探针。方法　PCR扩增目的片段 ,并定向亚克隆至pSP72质粒T7启动子下游的多克隆位点 ,以T7RNA聚合酶转录合成反义RNA探针。结果　亚克隆插入的片段经测序、酶切鉴定 ,序列及方向完全正确 ,成功制备了用于的反义RNA探针。结论　成功地制备了用于核糖核酸酶保护法的MD 2转录模板和探针 ,为深入研究内毒素信号受体相关机制以及MD