c-Jun氨基末端激酶抑制剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治及机制

摘要

目的:探讨选择性c-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)抑制剂SP600125对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的保护作用及机制.方法:48只♂SD大鼠随机分为正常对照组(NC,18只)、模型组(HF组,15只)和SP600125干预组(SP干预组,15只).HF组及SP干预组大鼠高脂饮食12 wk,建立高脂诱导的NASH模型,12 wk时分别处死NC组大鼠6只,HF组及SP干预组各3只,用于NASH模型病理学鉴定.最终NC组、HF组及SP干预组大鼠数目均为12只.HF组及SP干预组大鼠建立经皮肠系膜上静脉给药途径,HF组给予二甲基亚砜,SP干预组给予SP600125(50 mg/kg),1次/d,连续4 wk.第16周处死全部大鼠,采用ELISA法测定匀浆液的肿瘤坏死因子α、白介素-6含量;HE染色观察肝组织普通病理变化.Masson染色观察肝组织纤维化程度.苏丹Ⅳ染色观察肝组织脂肪变的程度.采用RT-PCR方法检测JNK mRNA.采用免疫印迹(Western blot)法检测c-Jun蛋白和磷酸化蛋白水平.结果:高脂饮食16 wk后,SD大鼠肝组织呈弥漫性脂肪变性,炎性细胞浸润及小叶内坏死灶增多,可见明显的窦周纤维化及中央静脉周围纤维化.SP干预组大鼠肝组织炎性反应、脂肪变性及纤维化程度均较模型对照组改善,差异具有统计学意义;RT-PCR结果显示:正常大鼠肝脏组织内JNK mRNA表达量少,HF组表达量增加,差异具有统计学意义.而SP干预组较模型JNK mRNA表达量减少,差异具有统计学意义.Wstern blot结果显示:HF组较NC组大鼠肝组织中c-Jun蛋白及p-c-Jun升高,差异具有统计学意义.而SP干预组c-Jun蛋白及p-c-Jun较HF组明显减少,差异具有统计学显著性意义.结论:SP600125可能通过抑制JNK通路阻止NASH发生,有望成为治疗NASH的新型药物.