腺病毒介导CTLA4Ig基因转染骨髓基质细胞及其对CD34^+细胞粘附力的影响

摘要

目的　通过腺病毒介导CTLA4Ig在骨髓基质细胞 (Bonemarrowstromalcells ,BMSCs)中的表达 ,探讨CTLA4Ig基因修饰的BMSCs对CD3 4+ 细胞的粘附力的变化。方法　以CTLA4Ig 重组腺病毒按感染复数 (Mutiplicityofinfection ,MOI) 5 0转染BMSCs ,免疫组织细胞化学确定CTLA4Ig的表达 ,免疫磁珠 (MACS)阳性选择分选骨髓CD3 4+ 细胞 ,流式细胞仪检测其纯度 ,通过测定粘附于BMSCs的3 H TdR标记CD3 4+ 细胞的cpm值观察CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞的粘附力变化。结果　免疫细胞化学染色示CTLA4Ig表达阳性率达 85 % (MOI =5 0 ) ,弥漫性定位于细胞质 ;免疫磁珠阳性选择获取的骨髓CD3 4+ 细胞纯度可高达 97 8% ;转染组与对照组BMSCs对CD3 4+ 细胞的粘附力无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　CTLA4Ig 重组腺病毒能有效介导CTLA4Ig基因在BMSCs中表达 。