抗肝癌人源化Diabody在大肠杆菌中的可溶性表达及活性鉴定

摘要

目的:构建人源化抗肝癌双价抗体,并实现其在大肠杆菌中的可溶性表达. 方法:缩短人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的连接肽为5 肽,构建(hscFv25)2基因,克隆入原核表达载体后,转化入大肠杆菌表达,并纯化目的蛋白,细胞ELISA、免疫组织化学法检测其生物活性. 结果:目的基因在大肠杆菌中得到了可溶性表达,纯化蛋白的相对亲和力比亲本抗体提高了10倍左右,对肝癌组织切片的免疫组织化学染色呈强阳性,阳性率为75%. 结论:成功制备了人源化抗肝癌双价抗体,该抗体具有较高的亲和力,为进一步的临床研究奠定了基础.