扶芳藤益心方对缺血再灌注损伤后心内膜微血管内皮细胞的保护机制

摘要

目的 :研究扶芳藤益心方对人心内膜微血管内皮细胞(HUMCE)缺血再灌注损伤(IR)后的保护机制。方法 :体外培养HUMCE至第3代,将HUMCE分为造模组:扶芳藤益心方组(FY)、益心方组(Y)、卡托普利高(CAP1)、中(CAP2)、低(CAP3)浓度组、模型对照组和非造模组(N)。造模组进行缺氧/复氧(H/R)处理,非造模组不做缺氧/复氧处理,两组均添加相应的含药血清干预培养24 h后,采用硝酸还原酶法测定NO、NOS的含量,蛋白印迹法测定内皮素(ET-1)、内皮素转化酶(ECE)蛋白表达率,荧光定量测定ET-m RNA、i NOS-m RNA基因表达水平。结果:与非造模组对照,造模对照组细胞NO、NOS含量及i NOS-m RNA基因表达降低,ET-1、ECE蛋白表达及ET-m RNA基因表达明显增加(P<0.05)。与模型对照组比较:扶芳藤益心方组、益心方组NO、NOS含量和i NOS-m RNA基因表达升高,ET-1、ECE蛋白表达及ET-m RNA基因表达明显降低(P<0.05)。与扶芳藤益心方组比较:益心方组NO、NOS含量及i NOS-m RNA基因表达均明显降低(P<0.05),ET-1、ECE蛋白表达及ET-m RNA基因表达均明显增加(P<0.05);CAP1组NO、NOS含量及i NOS-m RNA基因表达均升高(P<0.05),ET-1、ECE蛋白表达及ET-m RNA基因表达均降低(P<0.05);CAP2组、CAP3组的NO含量及i NOS-m RNA基因表达均降低(P<0.05),ET-1、ECE蛋白表达及ET-m RNA基因表达均升高(P<0.05)。与益心方组比较:CAP1组、CAP2组、CAP3组的NO、NOS含量均升高(P<0.05),ET-1、ECE蛋白表达及ET-m RNA基因表达均降低(P<0.05),CAP3组的i NOS-m RNA基因表达降低(P<0.05);CAP1组、CAP2组的i NOS-m RNA基因表达均升高(P<0.05)。结论 :扶芳藤益心方通过下调人心内膜微血管内皮细胞缺血再灌注后的ET-1、ECE蛋白表达及ET-m RNA基因表达,导致内皮细胞缺血再灌注后ET-1分泌降低,上调i NOS-m RNA基因表达,提高内皮细胞NO、NOS的分泌,从而维持ET/NO平衡关系防止内皮细胞在缺血再灌注后的损伤。