人乳头瘤病毒16 E6转染冻融人外周血树突状细胞疫苗体外抗宫颈癌作用

摘要

目的:制备来源于人外周血并转染人乳头瘤病毒(HPV)16E6基因的冻融树突状细胞(DC)疫苗,检测其细胞形态,转染情况及体外诱导的免疫效应。方法:细胞因子扩增人外周血DC,低温-70℃冻存;Lipofectamine转染HPV16E6制备DC疫苗。动态形态学观察,免疫细胞化学检测E6分子表达,体外诱导并测定细胞毒性T淋巴细胞活性。结果:转染E6基因的人外周血冻融DC呈形态迥异的多突起状,免疫细胞化学染色显示E6蛋白表达阳性;MTT法检测人宫颈癌细胞株(CaSki细胞)的杀伤活性明显高于对照组(P0.05)。结论:转染E6基因的人外周血冻融DC疫苗保持了功能成熟DC的形态特征,且内源性表达E6蛋白,并在体外诱导出高效特异性的抗宫颈癌免疫反应,为宫颈癌的主动特异性免疫治疗提供了理想的疫苗和实验依据。