反义寡核苷酸-聚乙烯亚胺纳米微粒逆转耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性的研究

摘要

目的:以聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)为载体,将硫代寡聚脱氧核苷酸(PS-ODNs)转染到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)体内,通过药效学观察PS-ODNs逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性。方法:制备PEI与PS-ODNs结合的纳米微粒(PEI-ODNs纳米微粒);PEI-ODNs纳米微粒的粒径分析及结合率的测定;平板克隆形成实验计数菌落数(CFU);微量法测定细菌生长曲线;液体稀释法测定细菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果:PEI-ODNs纳米微粒的粒径为(85±22)nm,PEI与PS-ODNs的结合率最高为(97.3±1.1)%。含苯唑西林(6mg/L)的M-H琼脂板上,30μg/mL的PEI-ODNs纳米微粒组MRSA的菌落数为6.4×108/mL,而空白对照组的菌落数为3.3×109/mL,二者相比给药组菌落数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.01),而其他对照组与空白对照组比较差异无统计学意义。实验结果显示PEI-ODNs纳米微粒组的苯唑西林对MRSA生长有抑制作用,30μg/mL的PEI-ODNs纳米微粒可将苯唑西林对MRSA最小抑菌浓度由1024μg/mL降低至16μg/mL。结论:PEI与PS-ODNs的结合率很高且粒径较小,PS-ODNs可以部分逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性。药效学结果显示PEI可以有效地将反义寡核苷酸转入MRSA体内,可考虑将其作为反义寡核苷酸进入细菌的载体。