当药和水飞蓟提取混合物对毒性物质诱导的脂肪肝大鼠肝损伤的防治作用

摘要

目的:研究当药和水飞蓟提取混合物对大鼠在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliver disease,NAFLD)基础上由四氯化碳(carbontetrachloride,CCl4)诱导的肝损伤的防治作用及机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组、CCl4组、高脂饮食组、高脂饮食加CCl4组、当药和水飞蓟混合物组(提取物组)、甘草酸二铵组。正常组和CCl4组喂食普通饲料,其余大鼠均给予高脂饲料,提取物组和甘草酸二铵组大鼠同时分别采用当药和水飞蓟混合物或甘草酸二铵干预。8周后,除正常组和高脂饮食组外,其余各组大鼠均腹腔注射小剂量CCl4,注射48 h后收集血清和肝脏组织。苏木精和伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察肝脏组织病理学改变,检测血清丙氨酸氨基转移酶(alamine aminotrasferas,ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性,肝组织匀浆中三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,并用逆转录聚合酶链反应、蛋白质印迹技术检测解偶联蛋白2(uncoupling protein-2,UCP2)基因和蛋白表达水平。结果:肝组织HE染色显示,小剂量CCl4未导致正常饮食大鼠肝脏出现病理学异常改变,高脂饮食组出现肝小叶大面积肝细胞脂肪变性,高脂饮食加CCl4组脂肪变性加重,肝细胞气球样变和炎性细胞浸润明显,提取物组、甘草酸二铵组肝细胞脂肪变性、气球样变性和炎性浸润明显减轻。与正常组比较,CCl4组大鼠血清ALT、AST活性,肝组织TAG、MDA、GSH水平和UCP2表达无明显改变;各指标除GSH外在高脂饮食组较正常组及CCl4组略有升高;高脂饮食加CCl4组血清ALT、AST水平较高脂饮食组显著升高,肝组织TAG、MDA含量和UCP2 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),肝组织GSH含量明显下降;而提取物组和甘草酸二铵组各指标均显著改善(P<0.05)。结论:NAFLD大鼠肝组织对小剂量CCl4损伤敏感性显著增加,肝组织中氧化因素上调,抗氧化应激因素下调是其重要机制。当药和水飞蓟混合物可逆向调节这些氧化应激因素的改变,从而显著改善NAFLD大鼠肝组织对CCl4损伤的易感性。