含有Epstein-Barr病毒膜抗原的重组表达质粒及其基因免疫

摘要

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ（ＥＢ）病毒主要的膜抗原（ＭＡ）ＢＬＬＦ１基因片段插入ｐＨＤ１０１－３质粒的ＣＭＶ启动子下游，构建了真核表达质粒ｐＨＤ－ｇｐ３５０，并转染２９３细胞进行瞬间表达。用免疫荧光法从细胞膜检测到表达的抗原能与其单克隆抗体发生特异性结合，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法证实，表达的抗原分子量为３５０ｋＤ．用能在真核细胞表达的重组质粒ｐＨＤ－ｇｐ３５０的ＤＮＡ，经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ２Ｂ柱纯化后，注射经普鲁卡因预处理的Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠的四头肌，观察到ＥＢＶ－ＩｇＡ／ＭＡ抗体水平比ＥＢＶ－ＩｇＧ／ＭＡ低，而ＥＢＶ－ＩｇＡ／ＭＡ的持续时间比ＥＢＶ－ＩｇＧ／ＭＡ长。采用表达ＥＢＶＭＡ的质粒ＤＮＡ与ＣＨＯ细胞表达的ＭＡ蛋白免疫小鼠，均获得抗ＥＢＶＭＡ的抗体。