用随机6肽库筛选HGVE2抗原表位

摘要

利用抗 HGV E2区的 3株单克隆抗体 M6、M1 3、M30作为筛选配基 ,对随机 6肽库进行亲和筛选 . 3轮筛选的投入产出比逐轮升高至 3.5× 1 0 -3、假阳性率逐轮降低至 0 .4% ,提示具有良好的富集效果 .从第 3轮随机挑出 1 2个克隆进行功能鉴定 ,结果表明 8个克隆与 M6抗体有较强的特异性结合力并有较好的竞争抑制作用 ,测序发现它们的外源肽具有核心序列 :WA( W/Y) WXH,该序列与 HGV同源性低 ;用外源肽与核心序列相似的噬菌体克隆 P6GC9做竞争抑制试验 ,约 3×1 0 10个噬菌体即可较好地抑制 M6单抗与 HGV抗原结合 .该多肽可能是 HGV E2区识别 M6单抗并具有一定功能的模拟表位 .