开发实用的染色体加倍体系构建成烟草DH群体

摘要

通过对4种染色体加倍方法(烟草浸花药法、浸花培苗法,叶片再生法及浸腋芽法等)的比较研究表明:以4 g/L浓度的秋水仙碱浸泡花药法加倍率最高达47.5%～75%,其次为叶片再生法(30%～36.67%)和浸苗法(16.67%～32.35%),而浸腋芽法较低(17.78%).前两种方法加倍率虽高,但有较高畸形苗比率,叶片再生法工序较繁琐.作者认为烟草加倍单倍体产生,应以采用浸苗法为主.在使用秋水仙碱浸苗加倍时,添加DMSO可明显促进秋水仙碱的加倍效率,且促进作用随时间延长而提高;从高效、快捷和节约等原则考虑,我们开发了烟草有效的染色体加倍体系,以4g/L的秋水仙碱+20g/L DMSO溶液浸苗48h的效果最好.对两个组合烟草单倍体苗浸12h以上,其染色体加倍效率达到对照的2.30～2.93倍.本试验用较低浓度秋水仙碱添加DMSO有利于节约实验费用.通过完善染色体加倍技术程序已构建成2个DH群体,供基因定位研究.