乙肝病毒X蛋白HLA-A0201限制性CTL表位的筛选与鉴定

摘要

目的:应用T2细胞结合实验以及亲和力稳定性实验鉴定由网络表位预测服务和通用原则预测得到的乙肝病毒X蛋白(HBx)来源的HLA-A0201限制性CTL表位。方法:选择中国人群最常见的B、C基因型中的adw、adr血清型的乙肝病毒X基因序列,通过网络在线表位筛选服务,分析得到共同并且得分较高的表位,并根据超基序、延展基序及量化基序方案等通用表位筛选原则进行进一步的筛选,得到4条较为理想的九肽(HBx1,HBx2,HBx3,HBx4)作为候选表位。随后借助于流式细胞技术,通过T2细胞实验分析各候选肽以及阳性、阴性、空白对照的荧光系数,从而对所筛选的表位进行体外鉴定。结果:获得的4个候选表位(HBx1:VLCLRPVGA,HBx2:CLFKDWEEL,HBx3:VLHKRTLGL,HBx4:HLSLRGLPV)中HBx2的亲和力较高,HBx2和HBx4的稳定性较好。结论:CLFKDWEEL是一种乙肝病毒X蛋白潜在的HLA-A0201限制性CTL表位,下一步可通过体内试验对其免疫原性作一步的验证。