基于TLR2/MyD88/NF-κB信号通路探讨不可分型流感嗜血杆菌诱导支气管上皮细胞炎症的机制

摘要

目的初步探讨不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)对支气管上皮细胞炎症反应的影响及其分子机制。方法体外培养人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B),采用感染复数MOI=1、5、10的NTHi感染BEAS-2B细胞后,ELISA、qRT-PCR检测细胞上清中IL-1β和IL-6及其mRNA的表达水平,并检测细胞内TLR2、MyD88的活化情况以及IκB的磷酸化水平;随后采用siRNA以及MyD88、NF-κB抑制剂预处理细胞,并检测细胞中IL-1β和IL-6的表达水平。结果MOI=1、5、10的NTHi刺激BEAS-2B细胞后,细胞内IL-1β和IL-6及其mRNA水平均显著增高(P<0.05),且TLR2以及MyD88的表达水平也要显著高于未刺激组(P<0.05)。Western blot结果显示,NTHi处理后细胞内IκB的磷酸化水平较未刺激组明显上升;siRNA沉默TLR2及采用NF-κB抑制剂、MyD88抑制剂后细胞中IL-1β和IL-6分泌水平较对照组显著降低(P<0.05)。结论NTHi能够通过激活TLR2/MyD88以及NF-κB信号通路诱导支气管上皮细胞BEAS-2B分泌促炎因子IL-1β以及IL-6。