禽腺病毒4型与鸡传染性贫血病毒双重PCR检测方法的建立

摘要

为研究一种可同时检测FAdV-4和CIAV的方法,本研究建立了一种敏感、特异、快速的PCR检测方法。本试验参考GenBank中FAdV-4的Hexon基因和CIAV的VP基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为291 bp和473 bp的特异性引物,通过对反应条件的优化,评估特异性和敏感性试验,成功建立了FAdV-4和CIAV的双重PCR检测方法。结果显示,该方法最佳引物比例为FAdV-4和CIAV上下引物均为0.5μL（20mol/L）;最佳退火温度为60.0℃;灵敏度分别达到64 fg（FAdV-4）和48 fg（CIAV）;对常见鸡病病原体进行检测,没有特异性扩增,结果均为阴性。结果表明,特异、敏感、快速、稳定等是本研究所建立方法的优势,可成功运用于同时快速鉴别诊断FAdV-4和CIAV的混合感染。