‘南通小方柿’cDNA文库构建及DkGA2ox2调控因子的筛选

摘要

本研究利用酵母单杂技术筛选DkGA2ox2基因上游转录因子,为进一步研究其表达调控机制提供理论基础。利用HiTAIL-PCR技术获得启动子序列,连入诱饵载体,转化进诱饵菌株。利用Gateway技术构建‘南通小方柿’cDNA文库,再共转化诱饵菌株,筛选得到转录因子。通过HiTAIL-PCR共获得1205 bp启动子序列。构建的文库库容为1.4×107,插入片段大小在750~2000 bp间,重组率100%。初步筛选出HB蛋白、FLL3蛋白和EIN3/EIL1蛋白3个候选蛋白,为探索DkGA2ox2基因上游调控机制提供了理论支撑。