单精子测序技术在常染色体显性遗传多囊肾患者植入前遗传学检测中的应用

摘要

目的:探讨单精子测序技术在植入前遗传学检测中的应用价值。方法:针对1例PKD1基因c.3815T＞G新发变异导致的常染色体显性多囊肾患者，应用单精子分离结合单精子测序技术完成单倍型的构建，用机械制动法分离50份单精子样本并进行全基因组扩增，设计变异位点及其上下游共187个单核苷酸多态性（SNP）位点的扩增引物，对扩增产物进行检测，确定未携带以及携带致病变异的染色体单倍型，将7份胚胎滋养层细胞活检样本作为对象，在完成全基因组扩增后，通过高通量测序进行检测，判断胚胎携带致病变异的情况，选取可用囊胚进行移植，于孕18周抽取羊水样本，确认胎儿是否携带致病变异。结果:通过单精子测序共筛选出47个SNP位点，成功构建单体型，植入前单体型分析提示5枚胚胎携带致病变异，2枚未携带，妊娠中期羊水基因检测证实胎儿未携带PKD1基因c.3815T＞G变异。结论:对于携带新发致病变异的男性，可通过单精子测序筛选SNP位点，通过连锁分析构建单体型，准确有效的进行胚胎植入前遗传学检测。