肺炎链球菌pbp2B、pbp2X和pbp1A基因突变与β-内酰胺类耐药相关性研究

摘要

目的:探讨肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)临床菌株pbp2B、pbp2X和pbp1A基因编码的青霉素结合蛋白(PBPs)的青霉素结合区(PBD)中SVVK、SSN和KTG基序及其邻近序列的突变与β-内酰胺类抗生素耐药相关性。方法:采用二倍稀释法检测36株肺炎链球菌临床菌株对4种β-内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度(minimal inhibitoryconcentration,MIC)。采用PCR扩增各菌株DNA中pbp2B、pbp2X和pbp1A基因片段并测序。根据药敏试验及测序结果,分析上述基因PBD或附近序列突变与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性。结果:36株肺炎链球菌临床菌株中,10株为青霉素敏感株(penicillin-susceptible SP,PSSP)、10株为青霉素中介耐药株(penicillin-intermediate SP,PISP)、16株为青霉素耐药株(penicillin-resistance SP,PRSP)。4株PSSP、9株PISP及16株PRSP菌株PBP2B中SSN的C端T445A/S突变,其余6株PSSP和1株PISP菌株无突变。MIC≥0.5 mg/L的7株PISP及16株PRSP菌株PBP2X中STMK出现T338A突变、KSG的N端出现L546V突变,2株PISP菌株SSN的N端分别出现H394Y/L突变,另有2株高度耐药PRSP菌株STMK的C端发生M342I突变。所有36株菌株PBP1A的SRN和KTG、10株PSSP菌株STMK序列均未发生突变,所有MIC≥1 mg/L的PISP和PRSP菌株PBP1A的STMK均出现T371A/S突变、SRN的C端出现P432T突变。结论:本研究结果显示肺炎链球菌临床菌株对β-内酰胺类抗生素耐药性与PBP2B、PBP2X和PBPA的PBD中SVVK、SSN和KTG及其邻近序列突变密切相关。