编码中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)一种组成型热休克蛋白70(HSC70)的cDNA克隆、测序及其表达分析

摘要

根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)EST序列信息设计引物，用RT-PCR方法，从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090bp的hsc70 cDNA序列，包括长1956bp的完整编码序列(complete CDS)及部分5’端和3’端非翻译区(5’UTR和3’UTR)．PCR及测序结果分析显示，hsc70cDNA的1-547bp碱基所对应的基因组序列可能含有内含子，548～2090bp碱基所对应的基因组序列不含内含子．根据编码序列推导出相应的652个氨基酸，与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较．发现中国明对虾HSC70与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)HSC71，人(Homo sapiens)HSC70，家鼠(Mus musculus)HSP70，烟草天蛾(Manduca sexta)HSC70的相似性分别是85．9％，85．9％，85．8％，85．4％，表现出较高的保守性．表达分析显示，hsc70 mRNA在中国明对虾正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血细胞、心脏、卵巢、肠和鳃等组织存在，并呈组成性表达；受到整体热休克后的对虾肌肉组织hsc70 mRNA水平(以β-actin mRNA水平为内标)与对照组没有显著的差异．