软脉灵对血管平滑肌细胞丝切蛋白的影响

摘要

目的观察软脉灵药物血清对血小板源性生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)骨架蛋白α肌动蛋白和调节蛋白丝切蛋白(cofilin)重排的影响。方法组织块贴壁法培养VSMC,α肌动蛋白单克隆抗体鉴定细胞,间隔12h灌胃5次后制备SD大鼠软脉灵药物血清;将VSMC按照如下方式进行处理:未作任何处理(空白对照组)、加入PDGF(10μg/L,PDGF组)、10%正常血清+PDGF(正常血清组)、10%软脉灵药物血清+PDGF(软脉灵药物血清组)和阿托伐他汀+PDGF(Ator组)。使用免疫荧光技术对丝切蛋白和α肌动蛋白进行染色,激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白的重排情况,并通过共聚焦显微镜软件计算丝切蛋白的荧光强度变化。结果PDGF刺激后,细胞呈梭形,细胞骨架重排,细胞浆中出现应力纤维且排列集中;丝切蛋白表达增强(空白对照组32.05±6.10比PDGF组77.68±13.15,P<0.01),且和微丝"共位"于胞质和板状伪足处,沿细胞膜边缘呈线状分布。10%软脉灵药物血清干预1h后,细胞微丝无集中排列,应力纤维减少且排列松散,丝切蛋白表达减弱(软脉灵药物血清组61.15±6.23比PDGF组77.68±13.15,P<0.01;软脉灵药物血清组61.15±6.23比Ator组51.85±10.59,P=0.036),板状伪足减少且只有少量微丝和丝切蛋白分布。结论 PDGF可增强血管平滑肌细胞骨架蛋白丝切蛋白的表达;软脉灵药物血清可抑制细胞骨架调节蛋白丝切蛋白的表达和在胞质中重排,抑制PDGF诱导的VSMC形态变化。